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HE染色需要哪些材料及实验步骤

发布日期:2020/4/29 9:32:00来源:http://www.sxyksw.com/news361432.html

详细介绍

陕西依科生物从事病理技术服务多年,今天向大家科普一些HE染色方面的知识。

人体中的细胞有颜色吗?

我们在显微镜下观察组织和细胞的时,通常要把组织和细胞做成切片或是涂片,这时组织和细胞的厚度一般在1~10微米,在这个厚度的条件下,组织和细胞具有较好的透光性,基本上就没有颜色。没有颜色非常不利于对组织和细胞的观察,因此,人们发明了多种给组织和细胞上色的方法,称为染色(stain)。其中苏木精-伊红染色(HE染色)是较常用的染色之一。

HE染色全名为苏木精和伊红染色方法,是较基本的病理学染色技术。

那么,到底怎样才能制作出一张高质量的HE染色切片呢?

实验材料

固定液:常用95%乙醇和冰丙酮

苏木精染液:称取苏木精粉0.5g,铵矾24g溶解于70ml蒸馏水中,然后取NaIO 31g,水5ml,再加入甘油30ml和冰醋酸2ml,混合均匀,滤纸过滤,备用。

伊红染液:称取0.5g水溶性伊红染液,溶于100ml蒸馏水中。

稀盐酸乙醇溶液:用75%乙醇配制1%盐酸。

系列浓度的乙醇、二甲苯、中性树胶。

培养瓶、培养皿、眼科镊、盖玻片、载玻片、显微镜。

实验步骤

1,石蜡切片脱蜡至水

依次将切片放入二甲苯Ⅰ10min-二甲苯Ⅱ10min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-95%酒精5min-90%酒精5min-80%酒精5min-70%酒精5min-蒸馏水洗。

2,苏木素染细胞核

切片入Harris苏木素染3-8min,自来水洗,1%的盐酸酒精分化数秒,自来水冲洗,0.6%氨水返蓝,流水冲洗。

3,伊红染细胞质

切片入伊红染液中染色1-3min。

4,脱水封片

将切片依次放入95%酒精I 5min -95%酒精II 5min-无水乙醇Ⅰ5min -无水乙醇Ⅱ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min中脱水透明,将切片从二甲苯拿出来稍晾干,中性树胶封片。

5,显微镜镜检,图像采集分析

实验结果

细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。

以上就是HE染色的相关介绍,如果您有这方面的需求欢迎来电咨询我们。