WGA染色方法

麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin，WGA)是一种 36kDa的凝集素，广泛应用于细胞生物学，可以特异性结合心肌细胞膜上的糖蛋白，将心肌细胞膜染出来。通过WGA染色，可以分析心肌细胞直径、面积等，来判断麦胚凝集素(Wheat germ agglutinin，WGA)是一种 36kDa的凝集素，广泛应用于细胞生物学，可以特异性结合心肌细胞膜上的糖蛋白，将心肌细胞膜染出来。通过WGA染色，可以分析心肌细胞直径、面积等，来判断心肌细胞是否肥大等病变情况.

实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ 6min-95%酒精  6min-85%酒精 6min-75%酒精  5min-流水冲洗；

2.抗原修复：组织切片置于盛有柠檬酸（PH6.0)抗原修复液的高压锅内进行抗原修复，喷气计时2.5min， 自然冷却后将玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 5min；

3.加WGA染色液：组化笔画圈，防止液体扩散，加稀释好的WGA染色液，37℃孵育1h；

4.洗片：玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 8min；

5. DAPI染核：滴加 DAPI，室温孵育10min，之后玻片置于 PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤 3 次，每次 6min；

封片：抗荧光淬灭剂封片；

6.镜检拍照：切片于荧光显微镜下观察并采集图像。（DAPI紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，发蓝光；FITC激发波长465-495nm，发射波长515-555 nm，发绿光；）。

三、染色结果判读：DAPI染出来的细胞核在紫外的激发下为蓝色，WGA阳性表达为的绿色。