HE染色实验原理及注意事项

HE染色是病理学染色技术中比较常见的一种，同时HE染色也是目前国内外病理诊断上广泛采用的常规染色方法。一张好的HE切片是保证正确病理诊断的关键。切片质量的好坏，可直接影响疾病诊断的及时与准确性。作为一个合格的实验技术员,能制作出一张高质量的HE染色切片，是必须掌握的一门重要功课。

HE染色的实验原理及注意事项

一、细胞核染色原理:

HE染色为碱性天然染料，可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA的双螺旋结构中，两条核苷酸链上的磷酸基向外，使DNA双螺旋的外侧带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精碱性燃料以离子键或氢键结合而被染色。苏木精在碱性溶液中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。

二、细胞浆染色原理:

细胞浆内主要成分是蛋白质，为两性化合物、细胞浆的染色与pH值有密切关系，当pH调到蛋白质等电点4.7-5.0时，胞浆对外不显电性，此时酸或碱性染料不易染色。当pH调到6.7-6.8时，大于蛋白质的等电点pH值，表现酸性电离，而带负电荷的阴离子，可被带正电荷的染料染色,现时胞核也被染色,核和胞浆难以区分。因此必须把pH调至胞浆等电点以下，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷(阳离子) ,就可被带负电荷(阴离子)的染料染色。伊红Y是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷(阳离子)结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织，嗜伊红颗料等被感染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。