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免疫荧光双标技术步骤和原理

发布日期:2021-9-3 9:16:00来源:http://www.sxyksw.com/news677983.html

详细介绍

免疫荧光技术根据原先的抗体里面的原理在原先的荧光素,是在原先的抗体的一部分本质上的东西,制成荧光抗体,再用这种荧光抗体(或抗原)作为探针检测组织或细胞内的相应抗原(或抗体)。在组织或细胞内形成的抗原抗体复合物上含有标记的荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受外来激发光的照射而发生明亮的荧光(黄绿色或橘红色),可以看见荧光所在的组织细胞,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量。

然后在免疫荧光双标技术在对细胞生长在培养时,需要选择适量的固定细胞。一般需要在加入抗体孵育前,对细胞进行通透处理,以保证抗体能够到达抗原部位。选择通透剂应充分考虑抗原蛋白的性质。间接免疫荧光需要使用二抗。室温避光孵育1h.PBST漂洗3次,每次冲洗5min后,再用蒸馏水漂洗一次。