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发布日期:2022/1/24 14:55:00来源:http://www.sxyksw.com/news759103.html
免疫荧光双标技术介绍实时荧光定量PCR是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法。通过内参或者外参法对待测样品中的特定DNA序列进行定量分析的方法。
免疫荧光双标技术介绍实时荧光定量PCR是实验室较常用的实验,是一次由定性技术向定量技术的飞跃,运用该项技术,可以对DNA、RNA样品进行相对定量、绝对定量和定性分析。实时荧光定量PCR技术以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点,提高了普通PCR技术的特异性和准确性,成为了分子生物学研究中的重要工具。
实时荧光定量PCR技术应用范围:
1)目的基因相对表达差异分析(2-△△CT);
2)miPNA检测;
3)基因型分析;
4)转基因生物(GMO检测);
5)细胞治疗药物组织分布检测;
实时荧光定量PCR技术优势:
1)灵敏度高,可以检测低拷贝的目的基因;
2)高精度,PCR扩增阶段包括3个阶段:指数增长期、线性增长期和平台期、96个重复指数增长期表现出高精度,而平台期则变化差异较大;
3)定量能力强,简单的流程就能得到高质量的定量数据;
4)动力学范围宽,可以精确定量9个数量级的差异;
5)速度快,节省时间和劳力,不需要电泳检测;
6)安全,使用荧光染料发光,不用EB或放射性物质,极大降低对实验人员健康的威胁。
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