病理实验组织前期处理注意事项

1.取材前期准备工作

1.1取材器械准备

准备一支 HB 铅笔和一套取材器械。包括：组织剪、无齿镊、刀柄及一次性手术刀片，标本的取材的编号一定要用铅笔标注清晰，取材器械要锋利，尤其手术刀片。

1.2固定液的选取

固定液需要根据标本的制作而选取不能一概而论，常用固定液有以下几种：

①中性福尔马林：是最常用的固定液之一，固定效果好为免疫组织化学最常用的固定液，对组织穿透性好，组织收缩小；

②多聚甲醛：该固定液适用于动物灌注固定取材，也可用于组织标本的较长时间保存、 光镜及免疫组织化学实验；

③甲醛：一般作为固定剂使用的， 10%的甲醛是用水和40%的甲醛（9:1）混合而成，实际上是4% 的甲醛溶液；

④植物组织固定液FAA：分为50%的FAA和70%的FAA，适用于一般的植物根、茎、叶、花药、子房组织的固定及保存，在植物形态解剖研究上应用极广。

⑤戊二醛电镜固定液：戊二醛固定液的优点是对糖原、糖蛋白、微管内质网和细胞基质等有较好的固定作用。

1.3固定标本容器的选择

有时容器瓶口过小，刚取完的组织偏软可以放进去，等到固定好组织变硬无法取出标本， 由于过度牵拉而导致组织形态结构的；有时出现标本大小和固定液体积比例不合适，固定液过少导致组织固定不全，影响后期的实验结果。

2.取材

固定要及时  主要取之于活组织检查标本、动物模型组织标本、解剖标本均为新鲜组织夹取标本时用无齿镊以免对组织造成人为损伤，如机体死亡2h以上的组织可能有不同程度的自溶，其抗原可能发生变性、消失或严重弥漫现象，因此需要快速固定处理以免影响免疫组织化学标记效果。

刀具要锋利  防止人为因素影响切取标本是应用锋利的刀剪。

大小适宜  一般标本取的组织块厚度约为0.2~0.3cm，可根据性的略作调整，大小以1.5cm*1.5cm*0.2~0.3cm为宜，应于免疫组化的组织以1cm*1cm*0.2cm为好，不要太大，以免浪费试剂。

速度要快  取材时间要短，一些特殊的组织取材前要先灌注，比如脑组织。 

特殊处理  取材应避免取过多坏死组织或凝血块，组织上如果有血液、粘液、粪便等污物要先处理干净在取材，以免影响后期切片。

3.组织固定

适宜的固定液-固定组织是要注意固定液的量，一般情况下要求固定液的量应为组织的10倍以上，大标本不少于8倍。

适宜的时间-大多数组织应该在固定24h内（不超过48h）进行取材，脱水，如果固定时间过长会影响后续实验的结果（如免疫组化、免疫荧光，分子生物学、细胞遗传等）。

适宜的取材-根据组织快的大小决定固定时间，一般厚度不超过0.3cm的情况下固定时间为3-24h（如果组织固定好未及时脱水处理应保存在70%的酒精里）。

适宜的容器-固定的容器要相对大一些，防止固定后的组织大于容器难以取出，造成组织结构的破坏。

特殊组织的固定-肺、脂肪组织在固定的时候要用纱布或棉花把组织压住，让组织漂在固定液中间，得到充分的固定；胃、肠、皮肤等剖开的组织要先压平在固定；脑组织要先灌注再取材。注：所有的组织后期如果要做免疫方面的实验尽量先灌注，以免红细胞太多影响实验结果的判读。