PAS染色步骤及注意事项

PAS染色介绍

PAS染色法（Periodic Acid-Schiff stain）又称过碘酸雪夫染色，糖原染色。一般用来显示糖原和其它多糖物质。糖原染色是病理学中常规的染色方法之一，MeManus 在1946年先使用PAS技术显示黏蛋白，该法常用来显示糖原和其他多糖，该染色液不仅能够显示糖原，还能显示中性黏液性物质和某些酸性物质，以及软骨、垂体、霉菌、真菌、色素、淀粉样物质、基底膜等。

PAS染色原理

过碘酸能使细胞内的多糖乙二醇基氧化成二醛，再与Schiff氏液的无色品红结合，呈红色，定位于胞浆上。

PAS染色应用

随着医学实验技术的发展，糖原染色应用的范围更加广泛，如用以证明与鉴别细胞内空泡状的性质，心肌病变及其他心血管疾病的诊断，糖原累积病诊断和研究 ，糖尿病的诊断和研究，用于某些肿瘤的诊断等。除用于糖原的鉴定和黏液的显示外，还可以观察肾小球基底膜、结肠杯状细胞中性黏液物质、阿米巴滋养体和霉菌的着色。临床诊断、分类和治疗提供了重要的依据

PAS染色步骤

1.石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水冲洗；

2.滴加过碘酸氧化10min；

3.自来水冲洗1次，再用蒸馏水冲洗2次；

4.滴加雪夫试剂10-20min，镜下观察；

5.流水冲洗10min；

6.苏木素染核5min，流水冲洗；

7.分化液分化，流水冲洗返蓝；

8.无水乙醇脱水，二甲苯透明；

9.中性树胶封片。

结果判读

糖原、中性粘液物质、软骨基质、植物的真菌和细胞壁、上皮的基膜等均呈紫红色，细胞核浅蓝色。

注意事项

1.切片及脱蜡应该尽量干净，否则影响染色效果；

2.氧化剂氧化时间不宜过久，氧化时的温度在18-22°C；

3.氧化剂和Schiff染色液应置于4℃密闭保存，使用时避免接触过多的阳光和空气。使用前，提前30min 取出恢复到在室温后，避光暗处使用；

4.酸性分化液应经常更换新液，其分化时间应该依据切片厚蒲、组织的类别和酸性分化液的新旧而定，另外分化后自来水冲洗时间应该足够；

5.在氧化剂和Schiff染色液中作用时间非常重要，该依据切片厚薄，组织的类别等决定；

6.本染色液常用于常规组织切片染色，对于真菌、细胞、极其薄的切片，建议采购糖原 PAS染色试剂盒(细胞真菌专用)，因为其氧化剂和苏木素溶液浓度更低，不宜过染；

7.冷冻切片染色时间尽量要短；

8.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

结果展示