微小组织冰冻切片如何制作?

在实际工作中经常会有一些微小组织冰冻，微小组织体积一般为:1mmx1mmx1mm,针对微小组织的特殊性。冰冻制片应遵循如下方法:

1.切片的适宜温度:冰冻切片机应长期处于待机备用状态，冰冻台温度维持在-20~-25℃左右。不同的微小组织标本需要不同的切片温度。但微小组织由于体积小，温度不要太低，致组织变硬，不易切片。

(1)细胞较丰富组织,如肝、肾、淋巴结等，切片温度应在-18--19℃左右，冰冻时间不易过长，时间过长，组织易碎。组织变脆，可用手指在组织上摸一下再切或将组织拿出放置10秒左右。

(2)软组织、脂肪组织，切片温度应在-21--23℃左右，2~3μm，应迅速冰冻。(3)较硬或破碎组织，切片温度应在-19~-21℃左右。

(4)固定送检的冰冻组织要求新鲜，切忌放在生理盐水、乙醇或包入纱布中。取材时组织不能水洗，以免出现冰品。

2.固定液种类很多，采用的冰冻固定液以无水乙醇80ml+甲醛15ml+冰醋酸5ml。固定效果较好，染色细胞结构清晰。

3.调节防卷板和切片刀的角度，切片时进刀的速度应均匀平稳，速度过慢，切片增厚，容易脱片。

速度过快，组织易磕掉。一般将防卷板和切片刀的角度调节成5°，防卷板放置是否得当，直接影响切片能否展开。

4.贴片时要依靠载玻片的热量将组织吸附上来，贴片时载玻片与刀面的角度成30°~45°，切忌压片。

5.包埋剂常用有以下几种:①进口OCT 包埋剂;②羧甲基纤维素;③合成胶水;

取材时针对微小组织，在冰冻托上放置合成胶水，使微小组织埋在其中靠上位置，增大微小组织体积，保证切片时组织的完整性。使用效果与OCT相同，但价格低廉，不伤刀。

综上所述，用此方法制作微小组织冰冻切片，镜下:细胞核与细胞质染色对比分明，颜色鲜艳、透亮、组织变性程度较轻，并且简单快速、易作、经济实惠，效果满意。在制作微小组织冰冻切片时要在工作中不断摸索，总结工作经验。只有制作满意的冰冻切片，才能进一步提高冰冻病理诊断水平，为病理诊断提供可靠依据。