HE染色注意事项

HE染色的方法步骤我们之前有介绍过，今天向大家简述一下HE染色注意事项。

1.pH值

如果组织块在福尔马林中固定时间长，组织酸化而影响细胞核着色。因此，要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min，这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳，可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。

2.分色时间

HE染色过程中分色这一步是关键，应在显微镜下控制进行，一般以细胞核染色清楚（晰）而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅，应重新染色后再行分色。

3.酒精脱水应彻底

切片经酒精脱水后，入二甲苯时可出现白色不透明状态，此为脱水不彻底，应将切片退回无水酒精，更换酒精、二甲苯，以求彻底脱水与透明。切片从二甲苯取出或进入二甲苯前，切片周边均应擦干净或吸干多余水分。

4.避免切片干燥

在HE染色过程中不要让切片干燥，以免切片收缩、变形，影响神经元形态。

5、避免切片污染

出现切片污染，污染物遮盖该部位的细胞或组织难以观察期形态改变。应定期过滤各种染液和试剂以避免其中的沉淀物所引起的污染。

6、避免脱蜡不完全

冬季室温低时（14℃以下），二甲苯应在水浴缸中适当加温到30℃后再脱蜡，以避免因脱蜡不完全引起的染色不均匀呈雾化状态。

7、封片注意事项

然后封固时，要用中性树脂，防止日后褪色，盖片要选大于组织块的面积，如漏出一部分不久将会褪色，所用树脂浓度要适当，树脂封固时不能有气泡。