MASSON染色实验步骤及注意事项

Masson染色实验简介与原理

实验简介：masson染色是指用两种或三种阴离子染料混合，胶原纤维呈蓝色，肌纤维呈红色。用来显示组织中纤维以及炎性因子的染色方法之一。

实验原理：Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染)或绿色（被亮绿所染），肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染)，这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色，则可发现红细胞被小分子的阴离子染料着染，肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染，而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性小，肌纤维与胞质次之，而胶原纤维具有大的渗透性。根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。

二、Masson染色实验步骤

step1：石蜡切片脱蜡至水。

Step2：铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。

Step3：依次自来水和蒸馏水洗。

Step4：用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。

Step5：充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。

Step6：蒸馏水洗。

Step7：用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。

Step8：以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

Step9：1%磷钼酸水溶液分化3-5min。

Step10：不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。

Step11：以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。

Step12：95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。

实验结果：胶原纤维呈绿色/蓝色，肌纤维呈红色，红细胞呈桔红色，细胞核为黑色。

三、Masson染色实验注意事项

1．控制好染色步骤。

2．组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。

3．0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。

4．磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制， 肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。