Masson-Fontana黑色素染色

实验介绍   黑色素属于非血源性内生色素，是一组由黑色素母细胞产生的颜色从浅棕色到黑色的色素。这种色素 通常出现在皮肤表皮、眼睛、大脑的黑质和毛囊中。黑色素有一个显著的物理性质，即完全不溶解于大多 数有机溶剂——几乎可以肯定是由于黑素体中已形成的黑色素可不蛋白质紧密结合。黑色素另一个物理性 质是能够被强氧化剂漂白，尽管这个过程是缓慢的。在病理情况下，这种色素也可出现在良性痣细胞瘤中 和恶性黑色素瘤中。在常规HE染色中不呈黑色而是呈棕黄色或棕黑色。许多方法可用于识别黑色素和黑色 素生成细胞，如还原方法，如Masson-Fontana银技术和Schmorl三价铁-铁氰化钾还原实验；酶方法(如多巴反 应)；荧光方法；免疫组织化学。

实验步骤

1.石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水冲洗；

2.滴加Fontana氨银溶液1h，37℃，时间到后镜下观察黑色素染色情况；

3.蒸馏水水洗2次,3min/次；

4.滴加海波溶液5min，室温；

5.蒸馏水水洗2次，5min/次；

6.滴加中性红溶液，复染15min，室温；

7.染色后水洗至多余染料退掉；

8.入95%酒精10s，无水乙醇Ⅱ5s，洗至载玻片透明；

9.入二甲苯Ⅲ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅰ5min；

10.中性树胶封片。

三、染色结果判读：黑色素为黑色，细胞核为红色。