植物番红固绿染色方法

实验概述  

植物染色有多种染色方式，其操作流程和动物染色类似。番红O-固绿染色多用于软骨的染色，有时也可用于植物染色，木化、栓化和角质的细胞被番红染成鲜红色，纤维素的细胞壁被固绿染成绿色。固绿是一种酸性染料，可将纤维素的细胞壁和细胞质染成蓝绿色，该染液染色速度快，通常10-30s即可，不易褪色。

实验步骤

1.石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ8min-二甲苯Ⅱ8min-无水乙醇Ⅰ 6min-无水乙醇Ⅱ6min-95%酒精 6min-85%酒精 6min-75%酒精 5min-流水冲洗；

2.蒸馏水水洗2次，5min/次；

3.滴加番红染液染色45min左右，室温；

4.自来水水洗，洗去多余染料；

5.入90%酒精分化至组织附着的染料退去；

6.滴加固绿染液染色10-30s；

7.无水乙醇洗去多余染料，镜下观察番红与固绿着色情况；

8.入1:1二甲苯无水乙醇混合溶液2min，至载玻片透明；

9.入二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ5min，二甲苯Ⅲ5min；

10.中性树胶封片。

染色结果判读：木质化的细胞壁及核呈红色，薄壁细胞、细胞质呈绿色。

注意事项：固绿颜色着色程度不易把握，需严格控制。