肥大细胞甲苯胺蓝染色方法

服务介绍：

肥大细胞（Mast cell）来源于未分化的间充质细胞，正常多见于小血管周围，一般在结缔组织中都含有少量大量的肥大细胞，也常见于支气管和胰腺的小叶间导管周围，而在肠系膜的小血管周围却又大量的肥大细胞。肥大细胞较一般细胞大，直径约为20-30μm，呈圆形或椭圆形，胞核较小，圆形，胞质内充满粗大并具有异染性的圆形嗜碱性颗粒。肥大细胞染色的组要新鲜和迅速固定，其颗粒可因组织存放过久而被破坏。

检测原理：

甲苯胺蓝（Toluidine Blue O）是一种常用的人工合成染料，属于醌亚胺染料类。这类染料主要含有胺基和醌型苯环两个发色团，从而成色原显色。甲苯胺蓝中的阳离子有染色作用，组织细胞的酸性物质与其中的阳离子相结合而被染色。甲苯胺蓝不仅有两个发色团，还含有两个助色团，能促使染料产生电离成盐类，帮助发色团对组织产生染色力，使切片上的组织细胞着色，可染细胞核使之呈蓝色；肥大细胞胞质内含有肝素和组织胺等异色性物质遇到甲苯胺蓝可呈异染性的紫红色。

主要用途：

甲苯胺蓝染色法在临床上经常用于肥大细胞染色。

结果判读：

肥大细胞颗粒呈红紫色，细胞核呈蓝色。

实验流程：

脱蜡至水-甲苯胺蓝染色-冰醋酸分化-水洗-透明封片-显微镜镜检。

样本要求及运输条件：

1、提供固定合格的样本。组织离体后，选择合适的固定液立即固定，固定液的量建议大于组织体积的10-15倍，新鲜标本用合适的容器固定24-48h，大标本固定12h，再切开固定。标本常温（24℃左右）或冷藏（4℃）固定，切勿冷冻结冰，固定样本常温运输送样。

2、石蜡切片常温运输，冰冻切片-20℃运输。

注意事项：

1、染完后的切片不能长时间放在水里，易褪色。

2、组织一定要完全烤干后再封片，避免组织残留小水珠。