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发布日期:2025/3/14 8:29:00来源:http://www.sxyksw.com/news1065818.html
取材大小及固定
取材大小 通常取材组织块的厚度为0.2-0.3cm,大小1.0-1.5cm*1.0-1.5cm
常规动物组织固定:取材后,冲干净组织上的血渍污渍,浸入4%多聚甲醛或10%福尔马林室温固定24-48小时后,如果组织比较大可以延长固定时间,(如果固定好的组织不能及时脱水包埋,可将组织置于70%的乙醇里面4摄氏度保存)。
常规植物组织固定:取材后放入固定液固定12-24小时,固定液的选取:嫩组织用50%FAA、成熟的组织用70%FAA。
细胞爬片固定:弃掉培养基,PBS洗2次,5min/次,然后4%多聚甲醛固定20min,PBS洗2次,5min/次,放置 PBS 4℃保存,冰袋运输。
取材固定时的注意事项
固定要及时 主要取之于活组织检查标本、动物模型组织标本、解剖标本均为新鲜组织夹取标本时用无齿镊以免对组织造成人为损伤,如机体死亡2h以上的组织可能有不同程度的自溶,其抗原可能发生变性、消失或严重弥漫现象,因此需要快速固定处理以免影响免疫组织化学标记效果。
适宜的固定液 固定液是组织体积的10倍
适宜的时间 固定时间24-48小时
适宜的容器 大一点的容器,避免组织挤压
刀具要锋利 防止人为因素影响,切取标本是应用锋利的刀剪。
大小适宜 一般标本取的组织块厚度约为0.2~0.3cm,可根据性的略作调整,大小以1.5cm*1.5cm*0.2~0.3cm为宜,应于免疫组化的组织以1cm*1cm*0.2cm为好,不要太大,以免浪费试剂。
速度要快 取材时间要短,一些特殊的组织取材前要先灌注,比如脑组织。
特殊处理 取材应避免取过多坏死组织或凝血块,组织上如果有血液、粘液、粪便等污物要先处理干净在取材,以免影响后期切片。
特殊组织取材固定
脑组织:脑组织取材前要先灌注;
皮肤组织:皮肤组织取材前要把毛发脱干净,取完后,把皮肤组织平铺在滤纸上用大图针固定,再浸入固定液里面固定,如果皮肤有创口尽量把创口取到中间;
肠组织:肠组织取完后把肠道内容物冲洗干净,再固定,以免后期切片出现刀痕,如果要包埋肠卷,需要把肠道剖开卷好用大图针固定后再浸入固定液里面;
肺组织、脂肪组织:肺组织和脂肪组织固定时容易浮到固定液上方,需要用棉花把组织压到固定液的中间,这样才能固定充分;
骨组织:骨组织取材后先固定24小时,再进行脱钙,脱钙完成送检。
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