消化酶对免疫组化染色有影响，应如何正确使用

甲醛固定的组织石蜡包埋切片免疫组化染色，一般认为酶消化处理是十分重要的一步。甲醛固定是外检中普遍采用的固定方法、甲醛固定过程中易形成醛键而封闭抗原，因此做免疫组化染色时需用蛋白酶消化切片释放抗原。但酶消化不是所有的抗原都适用，有的抗原未经消化酶处理也能获得满意的染色结果，即使少数有一定程度的加强作用，但也有因酶消化致抗原被破坏而染色减弱。现在就在课堂上把消化酶对染色的作用给大家做个介绍:

1.消化酶对染色的作用(以十六种抗体作比较):

(1)经酶消化后染色效果增强的:如细胞角蛋白、结蛋白。

(2)经酶消化后染色减弱的有:乙肝病毒表面抗原、第八因子相关抗原，上皮膜抗原。

(3)经酶消化后染色未见明显的差异有:波纹蛋白、肌动蛋白、白细胞共同抗原、组织细胞抗原S-100 蛋白、妊娠特异性Beta-1-糖蛋白、溶菌酶、a-1-抗糜蛋白酶、癌胚抗原、乙肝病毒核心抗原。以上结果说明。以前认为消化酶可打开甲醛封闭的抗原的说法，并不完全符合事实、只有限的对一些抗原有增强染色作用，所以在使用时要有的放矢，不要笼统一锅端。

2.使用方法;酶消化在染色前用0.1%胰蛋白酶液在37℃的水浴箱内消30分钟、并设阳性和阴性空自对照。

免疫组化技术各酶消化的正确使用，可克服该技术的步骤多、时间长、容易脱片等问题，同时也可节省酶试剂的经济开支，降低实验的成本和配试剂的繁琐，减少工作量。