什么是免疫荧光双标实验

免疫荧光技术是病理染色服务中比较常见的一种技术服务，免疫荧光实验作为常见的实验之一，应用化学方法将荧光色素（主要是异硫氰酸荧光黄，fluorescein isoth iocyanate,FITC）与抗体结合起来，即荧光抗体，这种结合荧光色素的抗体的免疫原性并不因此而发生改变。

免疫荧光实验原理：在特定条件下用其着染标本，如果标本中存在有相应的抗原，荧光抗体便与标本中的抗原发生特异性结合，在荧光显微镜的蓝紫光或紫外光照射下，标本中的抗原抗体复合物便发出特异的荧光，荧光的出现表明被检标本中特异抗原的存在；如果标本中不存在相应抗原，两者便不能结合，水洗时，荧光抗体便被洗掉，因而标本在荧光显微镜下观察不呈现特异荧光。因此，可以根据荧光的有无及强弱来判定抗原与抗体是否存在或相对应。

那么常用的免疫荧光双标的实验过程是怎么样的呢，陕西依科生物就带着大家简单的了解一下！

(1)直接法双重免疫荧光标记：

将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合，滴加在标本上孵育，然后洗去未结合的荧光抗体，在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠，但灵敏度较低。

(2)间接法双重免疫荧光标记：

用未标记的两种特异性第1抗体孵育组织或细胞，洗去多余的第1抗体后，再用两种不同的荧光素分别标记的第2抗体孵育组织或细胞，洗去多余的第2抗体，后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察，从而对两种抗原进行定位和定量。使用此法应注意两种特异性第1抗体必须来源于不同种属，且荧光标记第2抗体的种属必须与第1抗体的种属相匹配。

以上就是免疫荧光双标实验的相关介绍，有需要免疫荧光服务的用户欢迎来电咨询我们。