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什么是免疫荧光双标实验

发布日期:2020-1-10 11:45:00来源:http://www.sxyksw.com/news314164.html

详细介绍


免疫荧光技术是病理染色服务中比较常见的一种技术服务,免疫荧光实验作为常见的实验之一,应用化学方法将荧光色素(主要是异硫氰酸荧光黄,fluorescein isoth iocyanate,FITC)与抗体结合起来,即荧光抗体,这种结合荧光色素的抗体的免疫原性并不因此而发生改变。

免疫荧光实验原理:在特定条件下用其着染标本,如果标本中存在有相应的抗原,荧光抗体便与标本中的抗原发生特异性结合,在荧光显微镜的蓝紫光或紫外光照射下,标本中的抗原抗体复合物便发出特异的荧光,荧光的出现表明被检标本中特异抗原的存在;如果标本中不存在相应抗原,两者便不能结合,水洗时,荧光抗体便被洗掉,因而标本在荧光显微镜下观察不呈现特异荧光。因此,可以根据荧光的有无及强弱来判定抗原与抗体是否存在或相对应。

那么常用的免疫荧光双标的实验过程是怎么样的呢,陕西依科生物就带着大家简单的了解一下!

(1)直接法双重免疫荧光标记:

将标记有两种不同荧光素的抗体(如抗A和抗B)以适当比例混合,滴加在标本上孵育,然后洗去未结合的荧光抗体,在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,即可对两种抗原进行定位和定量。直接法简便可靠,但灵敏度较低。

(2)间接法双重免疫荧光标记:

用未标记的两种特异性第1抗体孵育组织或细胞,洗去多余的第1抗体后,再用两种不同的荧光素分别标记的第2抗体孵育组织或细胞,洗去多余的第2抗体,后在荧光显微镜下分别选择两种相应的激发滤片观察,从而对两种抗原进行定位和定量。使用此法应注意两种特异性第1抗体必须来源于不同种属,且荧光标记第2抗体的种属必须与第1抗体的种属相匹配。

以上就是免疫荧光双标实验的相关介绍,有需要免疫荧光服务的用户欢迎来电咨询我们。